【论著】人类精子的两种早期凋亡改变及其与常规精液指标和精子核DNA完整性的关系

Hao-Bo Zhang, Shao-Ming Lu, Chun-Yan Ma, Li Wang, Xiao Li, Zi-Jiang Chen（中国）

目的：检测人类射出精液中的两种早期凋亡标志（磷脂酰丝氨酸的外显和线粒体膜电位）可否成为检测精子质量的良好指标。方法: 以 56 位到生殖中心男科进行常规精液检查的患者的精液样本为研究对象。采用Annexin-V/PI双染的方法检测精子细胞膜的磷脂酰丝氨酸（PS）的外显。采用JC-1（5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'- tetraethylbenimidazolyl carbocyanine iodide）染色的方法检测精子的线粒体膜电位（MMP）。分别将精子的两种早期凋亡改变（PS外显和MMP改变）与常规精液分析指标（密度、活动力和畸形率）和精子核 DNA完整性（TUNEL）进行相关性分析。结果: 通过Annexin-V/PI双染可将精子群体分为4个亚群，AN^-/PI^-精子的比率与常规精液分析指标呈正相关关系，与精子的MMP呈正相关关系，与精子的TUNEL(+)率呈现负相关关系。对于AN^-/PI⁺精子其结果与AN^-/PI^-精子的结果正好相反。早期凋亡AN⁺/PI^-精子比率与精子的MMP和活动力呈负相关关系。晚期凋亡AN⁺/PI⁺精子的比率与常规精液分析指标和MMP呈负相关关系，与精子的TUNEL(+)率呈现正相关关系。精子的MMP与常规精液分析指标呈正相关关系，与精子的TUNEL(+)率呈现负相关关系。结论: 虽然早期凋亡（AN⁺/PI^-）精子的比率只与精子的活动力有相关关系。我们研究显示：精液中各精子亚群的比率（Annexin-V/PI双染色），尤其是AN^-/PI^-精子的比率，和MMP的降低可以作为诊断男性不育的良好的指标，它们可以为预测IVF的结局提供一 些重要的信息。

关键词：Annexin-V；凋亡；DNA完整性；不育；线粒体；精子