【论著】43℃热处理对体外培养的猴支持细胞中热休克蛋白105, 70和60表达的影响

Min Chen, Jin-Xiang Yuan, Yu-Qiang Shi, Xue-Sen Zhang, Zhao-Yuan Hu, Fei Gao, Yi-Xun Liu（中国）

目的：研究热处理对原代培养的猴支持细胞中热休克蛋白（Hsps）105、70和60表达的影响，并分析可能的信号通路。方法：分离青春期恒河猴睾丸的支持细胞，以Western blot、实时定量PCR和免疫荧光化学法分析43℃热处理对三个热休克蛋白mRNA和蛋白表达的影响。结果：Hoechst 33342染核实验表明热处理后支持细胞并未发生凋亡。Hsp105在未处理的支持细胞有基础表达，热处理后12h其mRNA和蛋白水平升高了约20倍。未处理的支 持细胞不表达Hsp70，但热处理显著诱导了它在胞浆中的表达。Hsp70表达的变化时相与Hsp105相似。与Hsp105和Hsp70相比，Hsp60在热处理后的变化要小得多，43℃处理后12h-48h，其蛋白水平仅为对照的1.5倍左右。胞外信号调节激酶（extracellular regulated kinase,ERK）1/2的抑制剂U0126或磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide kinase-3, PI3K）抑制剂LY294002可部分阻断热处理对Hsp105和Hsp70的诱导作用。结论：这些结果表明ERK和/或PI3K信号通路可能介导热诱导的猴支持细胞热休克蛋白的表达，但这三种热休克蛋白的表达模式并不相同。该结 果提示它们在支持细胞中可能有不同的调节功能。

关键词：Hsp105；Hsp70；Hsp60；支持细胞；热处理；猴