【论著】阿霉素诱导的人精子H2AX磷酸化作用

Zhong-Xiang Li, Ting-Ting Wang, Yan-Ting Wu, Chen-Ming Xu, Min-Yue Dong, Jian-Zhong Sheng, He-Feng Huang （中国）

目的：研究阿霉素是否会导致人成熟精子DNA的损伤以及是否能够诱导磷酸化H2AX组蛋白（γH2AX）焦点的形成。方法：人精子经不同浓度的阿霉素处理后，应用免疫荧光染色和流式细胞学检测γH2AX焦点的形成，并通过彗星实验分析检测DNA双链断裂的情况。结果：中性彗星实验显示，用2微克/毫升的阿霉素处理精子不同的时间(0.5、2、8和24小时)，或者用不同浓度阿霉素（0.4、2和10微克/毫升）作用8小时均可造成DNA双链断裂。免疫荧光染色和流式细胞学结果显示，随阿霉素浓度和作用时间的增加，gH2AX的表达也增加。此外，阿霉素还能够诱导DNA维持/修复蛋白Rad50和53BP1与γH2AX同时出现。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）家族的抑制剂渥曼青霉素（Wortmannin）可以阻止Rad50和53BP1与γH2AX同时出现。结论：与在体细胞中一样， DNA双链断裂同样可以诱导人成熟精子H2AX磷酸化反应及随后募集DNA维持/修复蛋白。

关键词：阿霉素；人精子；DNA双链断裂；磷酸化H2AX组蛋白