【论著】睾丸支持细胞永久细胞系sk11和sk9及其与精子细胞的体外结合

Katja M. Wolski, Caroline Feig, Christiane Kirchhoff, Don F. Cameron（美国）

目的：测定睾丸支持细胞系sk11、sk9和sk11 TNUA5体外结合精子的效力。方法：睾丸支持细胞来源的永久细胞系sk11、sk9和sk11 TNUA5与精子细胞在加入或不加入生殖激素的情况下体外32℃共培养44小时。测定结合到细胞上的精子数量并进行统计分析。细胞粘附蛋白和滤泡刺激激素（FSH）受体分别用Western blot和RT-PCR检测。结果：所有的细胞系上结合的第8期精子细胞数量和第8期前精子细胞数量之间没有统计学差异。在精子细胞存在的情况下，支持细胞的细胞质内聚集了很多脂类，表明细胞的噬菌作用被激活。Western blot分析表明sk11 TNUA5细胞系中有N-cadherin的表达。无论加入精子细胞与否，FSH和睾酮处理细胞都能刺激N-cadherin的表达。在sk11 TNUA5细胞系中加入精子细胞能刺激espin的表达，加入FSH的结果也是如此。RT-PCR检测发现sk11 TNUA5细胞系中的FSH受体mRNA的转录在连续传代中下降。结论：分离的生殖细胞与支持细胞来源的细胞系sk9、sk11或sk11 TNUA5的体外结合是不可行的,因此这几株细胞系不能用来体外研究支持细胞与生殖细胞的相互作用，必须进行支持细胞的原代培养。

关键词：sk支持细胞；支持细胞系；支持细胞-生殖细胞结合；支持细胞-生殖细胞共培养；支持细胞-精子细胞结合复合物；体外细胞-细胞结合