【论著】 前列腺癌细胞中两个雄激素应答元件调节雄激素对MMP-2表达的调控

Ben-Yi Li, Xin-Bo Liao, Atsuya Fujito, J. Brantley Thrasher, Fang-Yun Shen, Ping-Yi Xu（美国）

目的：分析基质金属蛋白酶（MMP-2）启动子，并验证雄激素应答元件（AREs）参与雄激素诱导的MMP-2 表达。方法：用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）确定MMP-2的mRNA表达水平；用MMP-2启动子 驱动的荧光素酶检测确定在雄激素诱导活性中发挥作用的片 段；用染色质免疫沉淀分析和电泳迁移率检测（EMSA）证实 MMP-2启动子中已经被鉴定的AREs。结果：雄激素在 mRNA水平显著诱导了MMP-2的表达,该作用被雄激素拮抗剂必卡他胺阻断。MMP-2启动子上的从-1591到-1259碱基对（相对于起始密码子）区域的缺失削弱了雄激素诱导的报告子活性，再加上从5末端起到第562个碱基对区域的缺失进一步削弱了雄激素诱导的MMP-2启动子 的活力。这两个区域的序列分析结果发现它们是两个假设的ARE活性基序。定点突变方法导致的这两个 假设ARE基序的突变使得雄激素诱导的MMP-2启动子的活力锐减。这表明这两个假设的基序在雄激素诱导的MMP-2的表达 过程中是必需的。更重要的是，在染色质免疫沉淀分析中，雄激素受体在体内与包括这两个基序的启动子区域相 互作用。因而，雄激素受体在体外EMSA试验中，只特异地与野生型而不是变异的携带ARE基序的探针结合。 结论：前列腺癌细胞中, 两个ARE基序被证实在雄激素诱导的MMP-2表达中起作用。

关键词：雄激素；雄激素受体；雄激素应答元件；基质金属蛋白酶-2；启动子；前列腺癌