【论著】端粒酶hTERT基因反义核酸对TNF-α诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的影响

Xiao-Dong Gao, Yi-Rong Chen（中国）

目的：讨hTERT基因的两端部分硫代修饰反义寡核苷酸（AS PS-ODN）抑制前列腺癌细胞PC3端粒酶活性后，肿瘤坏死因子TNF-α对PC3凋亡的增敏作用。方法：采用端粒重复序列扩增法及TRAP-PCR- ELISA法检测前列腺癌细胞的端粒酶活性；采用MTT比色试验观察hTERT AS PS-ODN与TNF-α共同作用对前列腺癌细胞PC3生长活力的影响；倒置显微镜观察凋亡细胞的形态变化；通过流式细胞仪测定凋亡细胞的百分率。结果：hTERT基因AS PS-ODN作用于PC3细胞48小时，其端粒酶活性下降，作用72小时，其端粒酶活性受到抑制，与正义寡核苷酸组及空白对照组相比有显著性差异（P < 0.05）。hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48小时，PC3细胞的抑制率与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-a组及S PS-ODN + TNF-α组相比有显著差异（P < 0.05）。hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48小时，细胞出现典型的凋亡形态变化。hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞后加入4 mg/mL TNF-α作用48小时, 凋亡细胞的百分率分别与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-α组及S PS-ODN + TNF-α组相比有显著性差异（P < 0.05）。结论：通过hTERT基因AS PS-ODN能降低前列腺癌细胞PC3端粒酶活性；hTERT基因反义核酸对TNF-α诱导前列腺癌细胞PC3凋亡有增敏作用。

关键词：人端粒酶逆转录酶；反义寡核苷酸；端粒酶；前列腺癌细胞；肿瘤坏死因子α