《亚洲男性学杂志》 2011; 13 (1): 172-174
《亚洲男性学杂志》 2011; 13 (1): 172-174
缩短碱性DNA解旋时间不会影响到彗星检测法检测小鼠和人类精子DNA损伤的效果
Hirokazu Kusakabe and Hiroyuki Tateno (日本)
本研究将彗星实验(comet assay)用于小鼠和人类精子来检测碱性DNA解旋的时间效应。用DNA损伤剂甲烷磺酸甲酯(methyl methanesulfonate, MMS)或过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)对精子进行体外处理,然后植入玻片上的琼脂凝胶。将玻片浸入碱性溶剂(>pH 13)1、5、10、20分钟,然后在中性条件下电泳处理。对于小鼠精子,碱性DNA解旋时间越长,溶剂对照组中的彗尾越亮越长。但是对于MMS处理的小鼠精子,剂量相同时溶剂对照组中DNA损伤随时间的变化程度要小很多。经碱性处理1– 20min后也能检测到H2O2诱导的DNA损伤。对于人类精子,经碱性处理1min后MMS 和H2O2诱导的DNA损伤都能被检测到,而且损伤为时间依赖性。研究表明很短的碱性DNA解旋时间(1 min )不会影响彗星实验检测DNA损伤的效果。
关键词:碱性,彗星检测法,DNA损伤,人类,小鼠,精子
|