《亚洲男性学杂志》 2012; 14 (4): 574-579

诱导多能干细胞定向分化为雄性生殖细胞-----体外诱导结合体内移植的研究

新近研究表明小鼠和人来源的诱导多能干细胞可以定向分化为原始生殖细胞。然而，诱导多能干细胞是否具有向雄性生殖细胞分化的潜能还不得而知。本研究旨在探索小鼠来源的诱导多能干细胞向精原干细胞及晚期雄性生殖细胞诱导分化的能力。采用体外分化联合体内诱导的技术路线：首先，将诱导多能干细胞在不含维甲酸的培养基中自发分化为拟胚体，定量PCR检测发现此时OCT4的表达量显著降低而Stra8和Vasa的表达量升高；添加维甲酸后，继续培养拟胚体并通过免疫荧光鉴定到CDH1和GFRa1阳性的细胞，提示此时类胚体已经向精原干细胞分化；进一步将上述维甲酸诱导获得的生殖细胞，移植到生精障碍模型的小鼠体内，经免疫荧光鉴定在小鼠的生精小管中表达SCP3，提示iPS来源的生殖细胞（精原干细胞等）可在体内继续分化为圆形精子细胞。由此，本研究确立了诱导多能干细胞具有向晚期雄性配子分化的潜能。iPS来源的雄性配子对治疗男性不育具有很大的应用前景，同时为雄性生殖细胞发育的分子机制研究提供了重要的研究模型。

关键字：分化，诱导多能干细胞，雄性生殖细胞，维甲酸，移植