《亚洲男性学杂志》 2012; 14 (2): 285-293

《亚洲男性学杂志》 2012; 14 (2): 285–293

软琼脂培养基中雄鼠胚胎细胞向精细胞的分化

Mahmoud Abu Elhija, Eitan Lunenfeld, Stefan Schlatt and Mahmoud Huleihel (德国，以色列)

建立一种能使睾丸胚胎细胞发育成精子的体外方法，对精子发生的研究及未来男性不育的治疗很有价值。本研究中，我们用三维琼脂培养体系（SACS）开发了一种能诱导睾丸胚胎细胞分化到精子形成的最后阶段（包括精子的产生）的体外培养系统。酶解分离7天龄小鼠睾丸的曲细精管，将获得的小管内细胞置于SACS培养系统的上层培养，SACS培养系统上层含有加了FCS的RPMI培养基。SACS培养系统下层只含添加了FCS的RPMI培养基。培养14天和28天后分离上层细胞群，并根据它们的大小进行分类。用免疫荧光检验法和实时PCR方法测定未分化和已分化的精原细胞中(Vasa, Dazl, OCT-4, C-Kit, GFR-a-1, CD9和a-6-integrin)、减数分裂期细胞中(LDH, Crem-1和Boule)和减数分裂后期细胞中(Protamine-1, Acrosin and SP-10)的特殊标记物的表达。结果表明，SACS培养系统可以诱导小鼠睾丸减数分裂前期细胞的扩增并诱导它们分化成精子细胞。这些精子细胞的形态正常且含有顶体。因此，我们的结果证明，SACS培养系统可作为一种新型的体外培养系统，使减数分裂前期小鼠胚胎细胞发育成熟至减数分裂后期并产生形态学正常的精子细胞。

关键词：顶体精子，琼脂，体外培养，减数分裂，精子形成，精原细胞，精子，睾丸

此摘要文献来源： Elhija MA, Lunenfeld E, Schlatt S, Huleihel M. Differentiation of murine male germ cells to spermatozoa in a soft agar culture system. Asian J Androl 2012; 14: 285–93.