《亚洲男性学杂志》 2014; 16 (4): 623-630
【原创论文】作为男性避孕疫苗的卵泡刺激素受体N端57氨基酸蛋白的制备及应用
卵泡刺激素受体(FSHR),其只在支持细胞中表达,在精子发生过程中有重要作用,已在男性避孕疫苗研究和发展中引起广泛关注。这篇研究介绍了制备和纯化人FSHR上的长达57氨基酸的蛋白(FSHR‑57aa),验证了其免疫原性和抗生育效应。首先构建了pET-28a(+)-FSHR质粒,并在大肠杆菌BL21 StarTM (DE3)中表达,随后通过电泳分开,切胶回收,和重折叠透析。得到的蛋白通过蛋白印迹和高效液相色谱法鉴定,其条带接近7kDa,纯度为97.4%。雄猴免疫人的FSHR‑57aa后,在112天(第16周)血清特异IgG抗体达到峰值。用一个雄猴和三个雌猴交配后,雌猴的怀孕率下降,但是雄猴血清睾酮和雌激素与对照组相比没有改变。通过分析睾丸病理切片,发现尽管支持细胞有些损伤,但是血睾屏障仍然完整。我们的研究证实了人的FSHR‑57aa可能可以作为一种不干扰激素水平而影响精子生成的男性疫苗。
关键词:卵泡刺激素受体,原核重组表达,男性避孕,疫苗
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