《亚洲男性学杂志》 2014; 16 (5): 684-688

【原创论文】Klinefelter综合征的诊断：新型甲基化特异性
为感谢广大读者和作者的厚爱、促进国内外学术交流与合作，《亚洲男性学杂志》特推出当期中文摘要翻译：
实时定量PCR
本文研究目的为设计一种基于额外X染色体（X-ch）检测
的分子检测方法用于Klinefelter综合征的诊断。从26名47,XXY男
性，2名46,XY/47,XXY男性，22名46,XY男性和15名46,XX的女性
的外周血标本中提取DNA，并进行脱氨基处理。甲基化特异性的
定量多聚酶链反应（MS-qpPCR）以非甲基化和甲基化的X染色
体非活化特异性转录基因（XIST-U和XIST-M）拷贝为模板。X
染色体二倍体通过XIST基因甲基化状态来判定。46,XY/47,XXY
男性的嵌合程度通过核型分析和原位荧光杂交（FISH）的结果比
较来判定。数据分析应用Roche® LightCycler software v.3.5.3，包
括通过拟合点分析和溶解曲线分析决定交叉点（CPs）。所有对
照组女性和KS患者均检测到X染色体二倍体，而对照组男性只表
达XIST-M。XIST-U和XIST-M的交叉点范围分别是（29.5~32.5，
SD0.8）和（29~31，SD0.6）。嵌合度的检测极限为1%。根据2名
47,XXY/46,XY患者的XIST-U/XIST-M比值分析，计算出的嵌合率
（1.8%和17.8%）与FISH结果（2.3%和15%）相当。从DNA脱氨
基到最终数据分析的间隔小于9小时。本文得出结论：MS-qpPCR
是一种敏感、特异及快速的X染色体二体检测方法，可以用于KS
的筛查和诊断，甚至在低嵌合水平的47,XXY/46,XY患者也适用。
关键词：DNA甲基化；Klinefelter综合征；嵌合体；多聚酶链反
应
文献来源：Mehta A, Mielnik A, Schlegel PN, Paduch DA. Novel
methylation specifi c real time PCR test for the diagnosis of Klinefelter
syndrome. Asian J Androl 2014; 16: 684–688