《亚洲男性学杂志》 2015; 17 (6): 996-1005

本研究旨在探讨人生殖细胞分泌因子NODAL对梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症睾丸支持细胞的调控作用。首先，我们采用两步酶消化法和SATPUT方法分离获得无精子症患者睾丸的支持细胞和男性生殖细胞，并用RT-PCR和免疫细胞化学方法鉴定NODAL及其受体在人支持细胞和男性生殖细胞的表达。向体外培养的支持细胞添加人重组NODAL因子和其受体拮抗剂SB431542，采用CCK-8方法探讨其对人支持细胞增殖的影响；同时，采用定量PCR和Western blots方法检测支持细胞功能基因和蛋白的表达。结果发现，NODAL只在男性生殖细胞表达而在支持细胞无表达，而其受体ALK4、ALK7和ACTR-IIB在支持细胞和生殖细胞均有表达，提示NODAL可能分别通过自分泌和旁分泌途径调控支持细胞和男性生殖细胞的功能。人重组NODAL因子能够促进人支持细胞的体外增殖，然而，并未发现其影响CYCLIN A、CYCLIN D1和CYCLIN E的表达。另外，NODAL能够促进重要生长因子（GDNF、SCF和BMP4）的表达，而SB431542可降低其表达水平。NODAL对梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症睾丸支持细胞基因的调控并不完全一致。综上所述，本研究证实男性生殖细胞分泌因子NODAL能调控人支持细胞的增殖和基因表达。
关键词：无精子症；功能；人支持细胞；NODAL；增殖