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中文摘要

《亚洲男性学杂志》 2016; 18 (3): 475-479

HPV低危亚型(6和11)的持续性感染是引发尖锐湿疣
    的主要原因。由于其治疗后复发率很高,使用新的分子制
    剂会有一定的价值。本研究旨在利用重编程的规律成簇间
    隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR 相关(Cas)9系统在角
    质形成细胞中靶向性失活病毒E7基因。为了做到这一点,
    我们通过使用一个双引导RNA载体构建出了一个可同时靶
    向HPV6 / 11 E7两个基因的通用CRISPR-Cas9系统。载体转
    染入E7转化的角质形成细胞后,用Western-blot 分析检测
    了E7蛋白的表达水平变化,并用Sanger测序验证了E7基因
    序列的变化。用CCK-8法检测细胞增殖,Hoechst 33258染色、流式细胞分析及ELISA检测评估了细胞的凋亡。结果
    表明HPV6/11 E7 基因可以被单一的CRISPR-Cas9系统所
    灭活。另外,沉默E7基因将导致E7转化的角质形成细胞
    增殖受限并诱导其凋亡,但对正常角质形成细胞没有作
    用。我们的结果提示重编程的CRISPR-Cas9系统有可能会
    被用于辅助治疗尖锐湿疣。
    关键词: 凋亡;CRISPR-Cas9;HPV E7;增殖

 
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