《亚洲男性学杂志》 2016; 18 (3): 475-479

HPV低危亚型（6和11）的持续性感染是引发尖锐湿疣
的主要原因。由于其治疗后复发率很高，使用新的分子制
剂会有一定的价值。本研究旨在利用重编程的规律成簇间
隔短回文重复（CRISPR）/CRISPR 相关（Cas）9系统在角
质形成细胞中靶向性失活病毒E7基因。为了做到这一点，
我们通过使用一个双引导RNA载体构建出了一个可同时靶
向HPV6 / 11 E7两个基因的通用CRISPR-Cas9系统。载体转
染入E7转化的角质形成细胞后，用Western-blot 分析检测
了E7蛋白的表达水平变化，并用Sanger测序验证了E7基因
序列的变化。用CCK-8法检测细胞增殖，Hoechst 33258染色、流式细胞分析及ELISA检测评估了细胞的凋亡。结果
表明HPV6/11 E7 基因可以被单一的CRISPR-Cas9系统所
灭活。另外，沉默E7基因将导致E7转化的角质形成细胞
增殖受限并诱导其凋亡，但对正常角质形成细胞没有作
用。我们的结果提示重编程的CRISPR-Cas9系统有可能会
被用于辅助治疗尖锐湿疣。
关键词： 凋亡；CRISPR-Cas9；HPV E7；增殖