《亚洲男性学杂志》 2016; 18 (5): 735-746

【原创论文】正常生育男性成熟和未成熟精子的蛋
白组学分析
精子成熟过程失调是造成不育男性精子活力下降
和形态异常的主要原因。 本研究收集了健康生育男性
的精液， 用三层密度梯度离心法将精子分为成熟度依
次增加的四个部分。 从每个部分提取了蛋白， 在电泳
凝胶中将蛋白条带切下并进行了消化， 然后用LT QOrbitrap Elite串联质谱进行了蛋白组学分析。 用生物信
息学软件和数据库对差异蛋白进行了功能学分析。 用
Western blotting对感兴趣的功能蛋白的表达进行了验
证。 在所有四个部分的精子中共发现了1469个蛋白，
随着精子成熟程度的增加， 参与配子发生、 细胞活
力、 能量代谢、 氧化磷酸化的蛋白表达呈上升趋势，
而参与蛋白合成、 蛋白转运、 蛋白泛素化、 氧化应激
的蛋白表达呈下降趋势。 对四种蛋白（ 热休克蛋白70
1A, clusterin、 tektin 2 and tektin 3） 的Western blotting
进行验证的结果表明， 这四种蛋白的表达趋势与蛋白
组学结果一致。 本研究提供了正常生育男性精子成熟
过程中蛋白表达的变化， 可以为我们更好地认识不育
男性精子成熟过程中蛋白的异常变化提供线索。
关键词： 生物信息学； 蛋白验证； 蛋白质； 蛋白组
学； 精子成熟