《亚洲男性学杂志》 2009; 11 (2): 240-251

《亚洲男性学杂志》 2009; 11 (1): 240-251

特异性表达于附睾的核糖核酸酶A超家族成员人类核糖核酸酶9是一种新的精子结合蛋白

Gui-Zhi Cheng, Jian-Yuan Li, Fang Li, Hai-Yan Wang, Guang-Xia Shi （中国）

为研究人类核糖核酸酶99（RNase 9）的功能,我们构建了哺乳动物融合表达载体pcDNA-hRNase9，通过HEK293T细胞制备了人类核糖核酸酶9-His融合蛋白，并测定了该蛋白的N-端氨基酸序列。根据确定的成熟蛋白，通过E. coli制备了重组RNase 9蛋白，检测了其核糖核酸酶活性和抗菌活性，采用间接免疫荧光技术分析了人类核糖核酸酶9蛋白在成年人体组织的表达以及在射出精子、体外获能精子表面的定位。结果显示RNase 9蛋白对面包酵母tRNA缺乏核糖核酸酶活性，而对E. coli XLIBlue具有杀菌作用，并表现出剂量依赖和时间依赖的方式。间接免疫荧光法证实RNase 9蛋白在成体附睾组织大量表达，而在检测的其他成体组织没有表达，在射出精子和体外获能精子的表面则集中分布于整个头部和颈部。这些结果表明RNase 9蛋白可能在男性生殖道的宿主防御中发挥重要作用。

关键词：核糖核酸酶A超家族；附睾；附睾分泌蛋白；精子；精子成熟；男性生殖道；宿主防御