《亚洲男性学杂志》 2009; 11 (3): 342-350

《亚洲男性学杂志》 2009; 11 (3): 342 － 350

内膜注射重组杆状病毒后小鼠睾丸间隙组织特异性基因的表达

Hyun Jung Park, Won Young Lee, Jin Hoi Kim, Jae Hwan Kim, Hun Jong Jung, Nam Hyung Kim,Bo Kyung Kim, Hyuk Song（韩国）

本文的研究目的是在小鼠睾丸中利用改良的重组杆状病毒建立间质组织特异蛋白表达的基因传输系统。荧光绿蛋白（GFP）表达重组杆状病毒在本研究中用于体外转染睾丸细胞，并用于睾丸间质组织的内膜注射。在该重组杆状病毒中，昆虫特异的多面体启动子被巨细胞病毒-IE（CMV-IE）启动子代替。在冰冻的睾丸中通过荧光显微镜观察GFP 的表达。GFP在睾丸组织的表达用PCR测定，用Western blot 测定蛋白表达。用改良重组GFP杆状病毒体外转染睾丸细胞是有效的。GFP杆状病毒的睾丸内膜注射后，在间质组织中也发现了高水平的GFP表达。RT-PCR结果清楚地显示GFP基因在睾丸尤其是间质组织中的表达。编码重组大鼠类胰岛素生长因子结合蛋白（IGFBP-5）的改良杆状病毒的内膜注射也使睾丸和精液中IGFBP-5的量增加。总之，我们开发一种有效的睾丸细胞基因体外表达传输系统，尤其在使用内膜注射改良重组杆状病毒的间质组织细胞中有效。这种方法尤其适用于在睾丸外输精管的睾丸细胞的基因传输和蛋白表达研究中。

关键词：内膜注射，重组杆状病毒，睾丸基因传输